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      你知道沃特世色譜柱異常的解決辦法嗎

      點擊次數:11 發布時間:2022-03-09
       
        沃特世色譜柱在使用前,最好進行柱的性能測試,并將結果保存起來,作為今后評價柱性能變化的參考。但要注意:柱性能可能由于所使用的樣品、流動相、柱溫等條件的差異而有所不同;另外,在做柱性能測試時是按照色譜柱出廠報告中的條件進行(出廠測試所使用的條件是最佳條件),只有這樣,測得的結果才有可比性。
       
        沃特世色譜柱異常解決辦法:
       
        柱壓與硅膠基質的形態(如無定形或球形硅膠)、顆粒大小、填料合成條件、裝柱條件、所用流動相和分析時的溫度有關。不同廠家的色譜柱柱壓會有所差別,相同流動相和溫度的條件下,不同廠家的新色譜柱有的柱壓可能相差4、5個MPa,特別是低端和色譜柱之間,這一區別比較明顯。這是由色譜柱廠家所選用的硅膠基質及其生產條件決定的,這種差異的存在是正常的。同時需要說明的一點是,柱壓與柱效有一定的關系,通常柱效高的色譜柱柱壓相對而言會高一點,但柱壓高的色譜柱并不一定就具有高柱效。
       
        在沃特世色譜柱的使用過程中柱壓通常會出現兩種升高的形式:
       
        1、隨著使用時間的延長色譜柱柱壓慢慢上升,這是正常的;
       
        2、使用過程中(流動相和溫度沒有改變的條件下)色譜柱壓力突然升高很多。這種壓力突然升高的現象,通常是由工作人員操作不當引起的。
       
        原因:
       
        1、樣品太臟,使用前沒有過濾,導致柱篩板堵塞;
       
        2、樣品含有的雜質在流動相中的溶解性不是很好,與流動相混合后析出,導致柱塞板堵塞;
       
        3、使用緩沖鹽,處理錯誤,緩沖鹽在色譜柱中析出,堵塞塞板和鍵合相顆粒之間的孔隙。
       
        解決辦法對于第二種,即柱壓突然升高的情況,通常有以下幾種解決辦法:
       
        1、將色譜柱反接,用含水比例較大的流動相進行沖洗。
       
        2、色譜柱進樣一端的篩板取下,分別放在水中和甲醇中超聲或更換新的柱篩板。如果柱效沒變,但柱壓仍然較高,則應考慮進樣端填料受污染的問題,因此除了取下進樣端篩板超聲外,還需要挖掉進樣端的部分填料,挖去填料之前先檢查一下填料的顏色,如果填料的顏色發生了變化,則應該挖掉直到見到白色的填料為止。
       
        挖掉后色譜柱將出現一個缺口,填補缺口的填料可以從另一支相同品牌、相同型號的報廢色譜柱的出口端獲得,填料用有機溶劑如甲醇等調成糊狀裝入缺口處,壓緊刮平,再裝上篩板。

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